2013年 · 第93卷第32期

目的探讨结肠癌转移相关基因1（MACC1）蛋白在食管癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学和Western印迹方法检测了2010至2012年金华市广福医院胸外科手术切除的60例[男38例、女22例，年龄（50±12）岁]食管癌组织及相应癌旁组织中MACC1蛋白的表达情况，并分析其与食管癌临床病理因素之间的关系。结果MACC1蛋白的表达主要位于组织细胞的胞质及胞膜，在食管癌组织中总的阳性表达率明显高于相应癌旁组织[68.3%（41/60）比25.0%（15/60)，P<0.01]；Western印迹结果显示MACC1蛋白在食管癌组织中的表达水平高于癌旁肝组织（0.64±0.05比0.21±0.10，P<0.05）。MACC1蛋白的表达水平与食管癌的TNM分期和淋巴结转移及分化程度显著相关（均P<0.05）。结论MACC1的异常表达与食管癌的发生、发展密切相关。

目的探讨不同病理类型乳腺肉芽肿性疾病的超声特征及诊断可行性分析。方法回顾性分析2008年11月至2012年11月浙江大学邵逸夫医院32例不同病理类型的乳腺肉芽肿性疾病的临床表现、声像图特征和超声诊断信息，为辅助诊断乳腺肉芽肿性疾病提供依据。结果依据32例乳腺肉芽肿性病例，其超声特征可分为4型：管样型、肿块型、弥漫型和囊肿型。其中12例肉芽肿性乳腺炎和12例未分类的肉芽组织增生以管样型（6、5例）为主，其次为肿块型（4、5例）和弥漫型（各2例）；5例黄色肉芽肿、2例脂性肉芽肿和1例异物肉芽肿，除1例脂性肉芽肿为囊肿型外，其余均表现为肿块型。肉芽肿性乳腺炎和炎性肉芽组织增生这两组病例诊断准确率较高，超声下以炎症作为第一诊断的比例分别为10/12和8/12，而诊断为BI-RADS 4b及以上的均只有1例，分别为8.3%。黄色肉芽肿和异物肉芽肿超声下被误诊为癌概率则很高，BI-RADS 4b及以上误诊比例分别为4/5和1/1。结论超声诊断肉芽肿性乳腺炎和炎性肉芽组织增生具有一定的实用价值，但确诊依靠病理学检查结果。

目的比较保守治疗成人与儿童髁突矢状骨折的效果。方法1985年1月至2010年12月，解放军总医院口腔颌面外科收治的67例（82侧）髁突矢状骨折患者，用咬合夹板行保守治疗3~6个月，或其他保守治疗。治疗后6个月、1年时复诊，以后每年复诊1次。67例患者按其年龄分为2组，其中≥12岁的患者28例（34侧），<12岁患者39例（48侧）。最长随诊25年，最短2年。随诊时检查其下颌活动度、开口型，并行CT检查观测髁突形态改建情况。结果<12岁患者下颌功能恢复良好，仅有11例患者出现开口时下颌偏斜；CT检查39例48侧发生矢状骨折的髁突中，32侧髁突形态改建良好，16侧髁突表现部分改建，无髁突形态较差的患者出现。年龄≥12岁组患者中4例发生关节强直，15例开口时下颌偏斜；CT检查显示34侧髁突中，有6侧髁突形态改建良好，16侧髁突表现部分改建，12侧髁突形态改建较差。结论儿童的髁突矢状骨折采取保守治疗后髁突形态改建较成人佳，儿童髁突的改建能力较成人强。

目的探讨根治性膀胱切除前后实施扩大盆腔淋巴结清扫（e-PLND）对疗效的影响。方法回顾性分析2003年1月至2013年1月浙江大学金华医院泌尿外科行e-PLND+全膀胱切除术且具备完整病理资料的107例膀胱癌患者。男94例，女13例，平均年龄（62±10）岁。盆腔淋巴结清扫术按解剖部位将盆腔淋巴结分为10区6组进行。根据手术方式的不同进行分组：e-PLND后再行膀胱全切术（A组）47例；膀胱全切后再行e-PLND（B组）60例。比较两组手术时间、清除的淋巴结数目、淋巴结转移率、阳性淋巴结检出率和并发症等。结果比较采用χ2检验和t检验。结果临床及病理特征两组分布均衡（P>0.05）。A、B两组e-PLND时间分别为（83±27）与（78±24）min（P>0.05)，差异无统计学意义。A、B两组切除膀胱的手术时间分别为（79±41）与（113±44）min（P<0.01）；清除淋巴结数目分别为（25.5±9.7）与（29.0±8.4）枚（P<0.05），其中髂内区域分别为（5.7±2.9）与（7.2±3.5）枚（P<0.05)，骶前区域分别为（1.3±1.1）与（2.5±1.6）枚（P<0.01)，差异均有统计学意义。淋巴结转移率两组分别为34.0%（16/47）与31.7%（19/60）（P>0.05）；阳性淋巴结检出率分别为9.0%（108/1197）与7.5%（130/1743）（P>0.05）；并发症总发生率分别为23.4%（11/47）与20.0%（12/60）（P>0.05)，差异均无统计学意义。结论膀胱癌行根治性手术时，盆腔淋巴结清扫术后再行膀胱全切术较优。但膀胱全切后，须对髂内及骶前区域的淋巴结进行认真核查，必要时这2个区域要补充清扫。

目的了解乳腺癌雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER-2）免疫组织化学检查结果的可靠性并探讨影响因素。方法收集2004至2010年北京大学肿瘤医院148例浸润性乳腺癌治疗前肿瘤穿刺标本，重新切片染色（ER：SP1，PR：1E2，HER-2： 4B5)，自动化影像分析系统Ariol MB-8及一位高年资病理医师分别复核ER、PR与HER-2表达水平，并与原始报告比较。结果原始报告与自动化影像复核报告的一致率分别为ER：76.35%，PR：49.32%，HER-2：63.51%，Kappa值分别为0.12（P=0.020）、0.18（P=0.002）、0.08（P=0.200）；高年资病理医师复核报告与自动化影像复核报告的一致率分别为ER：93.92%、PR：81.08%、HER-2：76.35%，Kappa值分别为0.77、0.67、0.32（均P<0.001）。结论对于ER、PR、HER-2的表达，原始报告与自动化影像复核报告的一致性差。抗体，染色方法及读片方法差异可能是导致两者不一致的主要原因。

目的分析腹部创伤并严重腹腔感染患者的腹腔脓液细菌菌群分布及体外药物敏感情况。方法2001年1月至2012年5月南京军区南京总医院全军普通外科研究所收治的腹部创伤并发严重腹腔感染病例41例，获得腹腔脓液标本共123份，回顾性分析微生物实验室菌群及药敏结果，输入WHONET 5.4软件进行耐药性分析。结果41例患者腹腔脓液标本共分离出297株菌，平均（7.2±2.3）株。革兰阳性细菌占44.1%（131/297)，革兰阴性细菌占55.2%（164/297)，真菌占0.7%（2/297）。分离率前5位的细菌依次为大肠埃希菌（72株，24.2%）、金黄色葡萄球菌（66株，22.2%）、肺炎克雷伯菌（34株，11.4%）、粪肠球菌（28株，9.4%）和铜绿假单胞菌（21株，7.1%）。大肠埃希菌对头孢哌酮和亚胺培南的敏感率较高，均超过90%，分别为91%和98%。革兰阳性球菌对替考拉宁和利奈唑胺的敏感率均为100%，金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感率为100%。肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率为100%、对阿米卡星的敏感率为79%。铜绿假单胞菌对环丙沙星敏感率最高（90%）。结论腹部创伤并严重腹腔感染患者腹腔感染菌尽管以革兰阴性菌为主，但革兰阳性菌，特别是金黄色葡萄球菌感染比例也较高；头孢哌酮、环丙沙星、亚胺培南、万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺具有较高的抗菌活性。

目的制订肿瘤患者手术备血策略（SBOS)，探讨肿瘤患者手术备血、用血的影响因素。方法回顾性分析2002年10月至2012年5月中国医学科学院肿瘤医院手术备血患者的22 643人次备血申请资料和7430人次手术用血资料，并对入选资料的患者信息和检验结果进行分析。结果手术输血率为32.81%（7430/22 643）。根据患者手术部位和手术治疗备血、输血数据，建立肿瘤患者SBOS：用血百分比<30%的手术归入血型定型和抗体筛选，不用备血；其余类型手术采用交叉配血，备血量主要取决外科患者具体情况。多因素Logistic回归分析显示肿瘤患者的性别、血红蛋白、红细胞压积、血小板、总蛋白、白蛋白对手术是否输注红细胞有影响（OR=0.797、9.614、1.949、0.437、0.444、2.038，均P<0.05）；肿瘤患者的性别、血红蛋白、红细胞压积、活化部分凝血酶时间、凝血酶原时间、白蛋白、总蛋白对手术是否输注血浆有影响（OR=0.851、1.367、1.801、1.652、2.922、2.224、1.362，均P<0.05）。结论肿瘤患者手术备血，应充分考虑患者的血常规检查结果、凝血功能、蛋白水平的影响，合理进行备血申请和输血，保证用血科学、安全。

目的分析食管异物嵌顿后并发症发生的相关影响因素及软式内镜的治疗效果。方法回顾性分析北京大学第三医院消化科2005年1月至2012年12月经北京大学第三医院消化科软式内镜下治疗的101例食管异物病例资料，其中男52例、女49例，年龄（49±21）岁。所有患者在行咽部局部麻醉并禁食4 h以上后于消化科内镜中心行软式内镜下治疗。t检验或χ2检验比较组间差异。结果（1）异物嵌顿于食管上段及中段占到了所有食管异物的87.1%（88例)，异物嵌顿后至异物取出的间隔时间在食管上、中、下段差异无统计学意义（P>0.05）。（2）82.2%（83例）的食管异物患者在24 h内就诊，99.0%（100例）的食管异物患者在48 h内就诊。嵌顿的异物中食物类（包括食物团块、鱼刺、鸡骨及枣核）占到了76.2%（77例）。（3）上消化道造影诊断食管异物阳性率91.3%（21/23)，胸部或腹部X线片诊断食管异物阳性率为24.1%（7/29)，软式内镜取食管异物成功率94.1%（95例）。（4）所有异物中义齿取出难度最大，11例义齿嵌顿中4例失败。（5）并发症（除轻度划伤）发生率为48.5%（49例)，穿孔率为3.0%（3例）。异物嵌顿食管后是否出现并发症与患者年龄、嵌顿位置、嵌顿时间、异物大小均无关（均P>0.05)，而与异物是否刺入食管壁、合并食管狭窄、异物种类有关（均P<0.01）。异物嵌顿食管壁后是否出现穿孔则与上述因素均无关。结论异物在嵌顿食管后尤其是边缘锐利、刺入食管壁的异物，应尽可能在24 h内取出。

目的评估新型双极射频装置Habib 4X在肝肿瘤切除术中的价值。方法回顾性分析从2010年3月至2011年7月在浙江大学第二附属医院手术治疗的98例肝肿瘤患者的临床资料，并根据所行术式分为Habib组（44例）和对照组（54例，采用传统手术方法）。观察评估指标为：肝肿瘤切除时间、Pringle′s肝门阻断法使用、术中出血量、输血量、术后肝功能恢复及术后并发症、病死率、复发情况等。结果Habib组和对照组平均切肝时间分别为（67±22）和（93±23）min，差异有统计学意义（P=0.000）。Habib组需要肝门阻断率低于对照组[22.7%（10/44）比57.4（31/54)，P=0.001]，平均肝门阻断时间也较短[（7±2）vs（18±6）min，P=0.001]。Habib组平均出血量显著低于对照组[（243±132）比（500±421）ml，P=0.002]。术后Habib组肝功能恢复优于传统组，且Habib组术后无住院死亡患者，术后随访18个月无切缘复发病例。结论Habib 4X双极射频预凝固辅助肝肿瘤切除可以显著减少手术出血量，安全可靠且缩短手术时间，减少肝门阻断时间甚至无需阻断肝门，最大程度的减少了对肝功能的影响。

目的探讨早期生长反应因子3（EGR3）在口腔鳞状细胞癌（简称鳞癌）组织及肿瘤细胞系中的表达及其对肿瘤细胞生物学行为的影响。方法收集2008年10月—2009年12月北京口腔医院口腔修复科及河南省肿瘤医院肿瘤外科收治的口腔鳞癌患者肿瘤组织样本、配对癌旁样本共20例，对照组口腔黏膜样本7例。明确EGR3在20例口腔鳞癌肿瘤组织、癌旁组织及人口腔鳞癌细胞系KB和Tca-8113的表达情况。构建EGR3全长基因的表达质粒，转染并观察其对口腔鳞癌细胞系Tca-8113细胞增殖、细胞凋亡作用的影响。结果EGR3 mRNA在口腔鳞状上皮细胞及癌旁组织相对表达量较高，分别为2.108±0.996和1.721±1.196，在肿瘤组织及口腔鳞癌细胞系中表达量较低，分别为0.007±0.005和0.007±0.001（均P<0.05）。转染48 h后，EGR3转染组肿瘤细胞Tca-8113增殖指数显著低于空质粒对照组（0.35±0.11比0.82±0.21，P<0.05)，Tca-8113中晚期凋亡率（膜联蛋白V/碘化丙啶双阳性细胞群）与空质粒对照组相比差异具有统计学意义（23.12%±6.65%比5.96%±0.98%，P<0.05）。结论EGR3在口腔鳞癌呈现低表达或表达缺失，EGR3的过表达可显著抑制口腔鳞癌生长、促进肿瘤细胞的凋亡。

目的对比分析分离人脐带间充质干细胞（MSCs）常用方法的效果，筛选比较高效的分离方法。方法采集足月剖宫产手术胎儿的脐带组织（n=15)，充分洗涤后去除3条脐血管及脐带外膜，将其剪碎至1 mm3的组织块，洗涤离心确定组织块的总体积，平均分为4组，分别采用组织块法和单纯胶原酶Ⅱ消化法、胶原酶Ⅱ+胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法，分离获得人脐带MSCs，行锥虫蓝染色计数细胞；倒置相差显微镜观察细胞形态；使用免疫荧光染色检测细胞表面标志物CD105、CD90、CD73、CD31、CD44、CD45、人类白细胞抗原Ⅰ（HLA-Ⅰ）和人类白细胞抗原Ⅱ类分子（HLA-DR）的表达情况，进行细胞鉴定；噻唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖曲线。结果组织块法和单纯胶原酶Ⅱ消化法、胶原酶Ⅱ+胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法4种方法均可分离获得干细胞，但获得细胞的数量和增殖能力不同。4种方法获得的细胞数量分别为（5.44±0.21）×105、（4.03±0.24）×105、（4.91±0.33）×105和（5.94±0.40）×105，胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法显著多于其他3种方法，差异均有统计学意义（均P<0.05）。组织块法种植后第9~ 11天观察到细胞在组织块周围生长，而其他3种方法种植后第2天即可见贴壁生长的细胞。4种方法细胞达到90%~ 95%融合的时间分别为（18.5±3.5）、（8.0±1.0）、（7.5±1.5）、（3.5±0.5）d，胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法显著短于其他3组，差异均有统计学意义（均P<0.05）。组织块法原代细胞的形态多为多角形，不规则，细胞的体积较大，单纯胶原酶Ⅱ消化法和胶原酶Ⅱ+胰蛋白酶消化法原代细胞的形态均较短小，而胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法细胞形态呈细长的梭形。4种方法得到的细胞均阳性表达CD105、CD90和CD73，弱表达HLA-Ⅰ，不表达CD31、CD45和HLA-DR。胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法细胞的增殖速率显著快于其他3种方法。结论胶原酶Ⅱ+透明质酸酶消化法是一种高效的提取人脐带MSCs的方法。

目的探讨气道剪应力（SS）作用下黏蛋白（MUC）5AC胞外极向分泌的主要介导分子。方法常规培养16HBE细胞，使用Stata软件产生随机数字随机分为5组并分别进行如下处理：A组（对照组）：10%胎牛血清（FBS）+DMEM高糖培养液继续培养，不再予任何刺激；B组（SS组）：只给予节律性旋转装置产生的SS刺激；C组[SS+Rac-1特异性抑制剂（NSC23766）组]：给予SS刺激前30 min，加入NSC23766（10μmol/L）；D组（SS+微丝肌动蛋白解聚剂组）：给予SS刺激前30 min，加入细胞松弛素D（100μg/L）；E组[SS+皮层肌动蛋白结合蛋白（Cortactin）小干扰RNA（siRNA）转染组]：用成功转染Cortactin-siRNA的细胞予以SS刺激。每个实验组设6个复孔，重复3次实验用于统计学分析。采用节律性旋转装置模拟呼吸时气流对气道产生的SS作用。用Cortactin-siRNA转染抑制Cortactin功能。酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定细胞培养上清液中MUC5AC的胞外分泌量；Western印迹法检测Cortactin及其磷酸化（p-Cortactin）水平和转染效果；激光共聚焦显微镜观察微丝肌动蛋白的聚合情况。结果Cortactin-siRNA转染成功。A、B、C、D、E组MUC5AC相对含量分别为0.210±0.013、0.631±0.025、0.473±0.112、0.330±0.067、0.272±0.019，B组均显著高于其他各组（P=0.000、0.043、0.000、0.000）；B组Cortactin相对表达水平为0.670±0.048，显著高于E组的0.132±0.014（P<0.01)，但与A、C、D组的0.641±0.016、0.622±0.012、0.653±0.027比较差异均无统计学意义（均P>0.05）；B组p-Cortactin相对表达水平为0.582±0.067，显著高于A、C、E组的0.131±0.011、0.393±0.045、0.170±0.016（P=0.000、0.021、0.000)，而D组（0.511±0.029）与B组差异无统计学意义（P=0.246）。结论Rac-1、Cortactin和微丝肌动蛋白是气道SS作用下MUC5AC胞外极向分泌的主要介导分子。