2013年 · 第93卷第17期

目的建立Lewis大鼠肌肉特异性激酶（MuSK）的实验性自身免疫性重症肌无力模型（EAMG）。方法以小鼠MuSK基因编码序列为模板合成小鼠MuSK抗原。以Lewis大鼠为实验动物，采取主动免疫方法将免疫原小鼠MuSK与弗氏完全佐剂混合制成抗原乳剂，免疫注射部位为大鼠尾根部皮下，抗原剂量分别为50μg和100μg，对照组大鼠仅免疫弗氏完全佐剂。免疫后隔日记录3组的临床评分，以酶联免疫吸附法（ELISA）检测免疫后第7天及第57天大鼠血清中MuSK抗体滴度。结果大鼠于免疫后第16天发病，第18~22天达到发病高峰。50μg实验组发病大鼠百分率为71.4%，100μg实验组发病大鼠百分率为100%，实验组总发病大鼠百分率为80%。第7天及第57天大鼠血清中，ELISA法检测显示实验组MuSK-Ab滴度显著高于对照组（P<0.05）。结论以上方法可成功诱导出MuSK特异性EAMG模型。该模型有助于揭示人类MuSK抗体阳性重症肌无力（AMM）的发病机制，并可为临床药物治疗提供实验学依据。

目的通过对比重症肌无力（MG）患者与正常人群的血清胆红素（BIL）和尿酸（UA）水平，分析BIL和UA在不同性别、不同分型及有无伴随胸腺增生/胸腺瘤MG患者之间的关系，进一步探讨血清BIL和UA在MG中的变化及其意义。方法选取2010年1月至2012年12月在安徽医科大学第一附属医院神经内科住院的MG患者131例，其中男68例，女63例，对照组176名为年龄和性别相匹配的同期健康体检正常人群，其中男96名，女80名。采用氧化酶定量分析法测定血清BIL及UA值，观察两组直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）、总胆红素（TBIL）及UA值之间的差异。分别对不同性别、不同类型及有无伴随胸腺异常改变MG患者的各项指标进行比较，并对影响血清BIL及UA水平的各指标进行相关分析。结果MG患者的血清IBIL、TBIL及UA值[（7.4±0.3）μmol/L，（11.0±0.4）μmol/L，（270±70）μmol/L]均显著低于正常对照组[（9.6±0.3）μmol/L，（13.0±0.4）μmol/L，（301±60）μmol/ L]，差异有统计学意义（P<0.01）。将两组受试者按不同性别分别比较时这种改变在男性和女性MG患者中均存在，且女性MG患者血清各指标值[（6.7±2.7）μmol/L，（10.1±3.7）μmol/L，（242±68）μmol/L]均显著低于男性[（8.4±4.2）μmol/L，（12.2±5.5）μmol/L，（288±73）μmol/L]，差异有统计学意义（P<0.05~0.01）。不同类型MG患者及有无伴随胸腺异常改变MG患者血清DBIL、IBIL、TBIL及UA水平之间无明显差异（P>0.05）。多元逐步Logistic回归分析显示在校正年龄、吸烟、性别、BMI、BUN、Cr、HDL-C及LDL-C等相关因素后，低TBIL水平者（TBIL<11.4μmol/L）患MG的风险是高TBIL水平的1.98倍；低UA水平者（UA<279μmol/L）患MG的风险是高UA水平的2.22倍。相关分析发现TBIL与Cr（r=0.151，P=0.008）、UA与Cr、HDL-C（r=0.301，P=0.000，r=-0.347，P=0.000）间存在一定的相关关系。结论MG患者血清IBIL、TBIL和UA水平均显著低于正常健康人群，此为将来防治MG的发生发展提供了新的思路和依据。

目的探讨喹诺酮类抗生素诱发重症肌无力症状加重的临床特点。方法总结2008年7月至2011年6月北京友谊医院神经内科收治随访的9例应用喹诺酮类抗生素导致症状加重的重症肌无力患者的临床资料。对9例患者的性别、年龄、加重前分型、临床绝对评分、伴随疾病、诱发疾病、所用抗生素、使用抗生素后加重时间/症状及加重程度、治疗措施及治疗1个月时预后等进行回顾性分析。结果环丙沙星（n=4）、左氧氟沙星（n=1）、盐酸莫西沙星（n=4）均有可能使重症肌无力症状加重，用药后加重时间为15 min至4 d不等，QMG评分平均增加10分，主要表现为呼吸困难、复视、眼睑下垂及吞咽困难，停药并加用对症治疗，临床预后较好。结论喹诺酮类药物能够加重重症肌无力患者的临床症状，需要临床医生警惕。

目的寻找盆腔腹膜后肿瘤的诊断依据，总结治疗方法。方法对象为于2000年10月至2011年10月因盆腔肿物就诊于北京大学人民医院的16例腹膜后肿瘤患者，总结一般临床资料、既往史、查体、辅助检查、术中所见、术后病理及术后随访等情况。结果2例患者通过MRI术前诊断腹膜后肿瘤，其余均术中发现。除1例因高龄，肿物糟脆行肿物大部分切除术外，其余均行肿物完整切除。术后病理良性病变10例，盆腔子宫内膜异位症（非典型增生）1例；恶性肿瘤患者5例。16例手术时间1.45~8.5 h，术中出血量50~5000 ml，12例盆腔存在较重粘连，7例术中请相关科室同台协作完成，1例术中发生髂外静脉损伤和膀胱破裂。16例中失访1例，12例恢复良好，2例因疾病复发死亡，1例术后4个月复发，目前化疗中。结论腹膜后肿瘤手术治疗是关键，其术前诊断率低，往往术中意外发现，手术困难，并发症多，必要时需多科室共同完成。术前正确诊断、充分的术前准备对治疗尤为重要，辅助检查中MRI不失为一种有效的手段。

目的探讨体外循环稀释式自体输血的临床应用及经验，为节约用血提供临床依据。方法回顾郑州大学第一附属医院心外科1996年9月至2012年3月共施行的5000例完全不用库血体外循环（CPB）手术的临床资料，分析自体输血的临床应用及血液稀释深度的临床经验。术中采血后的血压，中心静脉压、心率无明显变化。围手术期血气维持于正常范围。所有患者体外循环后将体外循环机中余血和诱导后采集病人的血液全部回输，术后6 h内血红蛋白（Hb）均达到90 g/L以上，术后仅129例进行2次开胸止血患者因血红蛋白低于70 g/L给予库血输入。结果血红蛋白（Hb），红细胞压积（Hct），酸碱值（pH），剩余碱（BE），乳酸（Lac），脑氧饱和度（rSO2），动脉血氧饱和度（SaO2）转机中与麻醉前相比P<0.05，但除Hb和Hct外，其余指标均属围手术期正常范围内。本组死亡146例，34例死于术后低心排，48例死于脑血管意外，28例死于恶性心律失常，另有36例死于肺部感染并多器官功能障碍，总体死亡率为2.92%，其余术后均恢复顺利，无心、脑、肾等并发症的发生。结论红细胞压积（Hct）15%~ 19%深度血液稀释配合良好的降温和麻醉管理在体外循环中是安全可行的。鱼精蛋白体外中和体外循环前预存的肝素血是节约用血的有效方法之一。

目的探讨支气管肺类癌（BPC）的手术治疗方式并分析影响其预后的因素。方法回顾性分析北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院胸外科1999年5月至2007年12月65例BPC手术患者的临床资料，并对性别、年龄、吸烟史、病理类型、肿瘤分期等进行单及多因素预后分析。结果肺段切除1例，肺叶切除36例，双肺叶切除6例，袖状切除4例，全肺切除11例，隆凸切除2例，主支气管成形4例，单纯探查1例。1、3及5年总体生存率分别为86.2%、73.8%和64.6%。单因素分析显示，性别（P=0.029）、年龄（P=0.003）、吸烟史（P=0.039）、病理类型（P<0.01）、肿瘤分期（P<0.01）、术后放化疗（P<0.01）、淋巴结转移（P<0.01）和手术性质（P=0.042）是影响预后的因素。多因素分析显示，病理类型（P=0.019）和淋巴结转移（P<0.01）是影响预后的独立因素。结论手术是BPC的首选治疗方法，手术切除方式目前仍以解剖性肺叶或全肺切除为主。影响其预后的独立因素是病理类型和淋巴结转移。

目的探讨乳腺磁共振动态增强扫描多时相减影技术在乳腺肿瘤中的应用价值。方法回顾性分析2009年3月至2012年2月在南京医科大学第二附属医院放射科72例经手术病理证实为乳腺肿瘤患者的影像学资料，所有患者术前均行数字化乳腺摄影。MRI动态增强扫描（DCE-MRI），在注射对比剂前行蒙片3D mask扫描，注射对比剂同时开始连续采集9个时相，绘制时间-信号强度曲线（TIC），并分别选择动态增强的第1和第2时相图像与蒙片进行减影，后行最大信号强度投影（MIP）重建，对比两个时相的减影图像，MIP图像及动态增强图像，分析其对病灶及肿瘤血管的显示与定性价值。应用χ2检验对乳腺良恶性肿瘤分别进行统计学分析。结果72例患者共检出83个病灶，手术证实为83个病灶。其中纤维腺瘤18例，共检出23个病灶，均未见肿瘤血管，动态增强第1及第2时相减影对病灶的显示差异无统计学意义；导管内乳头状瘤4例，其中仅1例伴导管内癌者，可见肿瘤血管显示；本组良性肿瘤第1与第2时相减影对病灶的检出无明显差异。导管内癌5例，其中1例可见细小迂曲的肿瘤血管；45例浸润性导管癌均可见肿瘤血管，37例为多支肿瘤血管，8例为单支肿瘤血管，共发现51个病灶；第1时相减影，检出36个病灶，第2时相减影检出51个病灶，两者差异有统计学意义。结论良性肿瘤动态增强不同时相减影对病灶检出差异无统计学意义，而恶性肿瘤不同时相减影对病灶检出差异有统计学意义，结合TIC曲线进行多时相减影重建对于病灶检出及肿瘤血管的显示有重要意义。

目的利用全脑皮层厚度分析技术分析2型糖尿病患者皮层厚度的变化以及胰岛素治疗对大脑皮层厚度的作用。方法对11名健康志愿者及11例2型糖尿病患者在基线（胰岛素治疗前）及随访水平（胰岛素治疗1年后）进行三维脑结构像扫描，并采用最近距离法计算皮层厚度图，并利用自动感兴趣法计算各脑区平均皮层厚度。统计学方法采用配对t检验。结果2型糖尿病患者双侧大脑及全脑平均平层厚度均小于对照组（P<0.05）;胰岛素治疗1年后，右侧大脑及全脑平均皮层厚度均大于随访前平均皮层厚度（P<0.05），左侧大脑平均皮层厚度差异无统计学意义（P>0.05）。各脑区平均皮层厚度分析提示2型糖尿病患者随访水平平均皮层厚度增加区域主要位于左侧内侧额叶眶回、双侧额叶岛盖部、右侧缘上回、右侧枕外侧回、左侧距状回、右侧梭状回、双侧颞下回、颞中回、左侧前扣带回尾侧、双侧内嗅皮层、左侧海马旁回、右侧岛叶及右侧前扣带回吻侧。结论2型糖尿病患者大脑皮层较正常人显著变薄，胰岛素治疗可使其皮层厚度广泛增厚，具体机制有待于进一步研究。

目的观察胫骨后倾（PTS）与非接触性前交叉韧带（ACL）断裂的关系及PTS对膝关节稳定性的影响。方法回顾性研究2008年1月至2012年10月非接触性ACL断裂患者150例，非ACL断裂的150例患者为对照;X线侧位片测量PTS角度，Lachman和轴移试验评估关节稳定性，并行统计学分析。结果ACL断裂组PTS角度为（9.5±2.2）°，对照组为（6.6±1.8）°，两组之间有明显差异，但仅见于女性患者;PTS增加对Lachman试验无明显影响，却明显影响轴移试验。结论PTS增加（>6.6°）的女性人群，ACL损伤的风险要明显高于PTS相对小的人群（<6.6°）；胫骨过度后倾会降低ACL断裂患者的膝关节轴向稳定性，而PTS较小患者，轴移试验阴性不能完全排除ACL损伤。

目的探讨具有容量反应性的休克患者中，动态动脉弹性（Eadyn）对快速扩容后血压反应性的预测价值。方法回顾性分析2011年1月至2012年12月收住北京协和医院ICU符合入选条件的患者32例。患者都因休克需快速扩容治疗。根据快速扩容后MAP的变化,患者分为平均动脉压（MAP）有反应组（MAP增加≥15%）和MAP无反应组（MAP增加<15%）评价两组快速扩容后MAP变化的影响因素、Eadyn对快速扩容后MAP有反应的预测价值。结果基线Eadyn是有效预测快速扩容后MAP变化的因素。预测快速扩容后MAP有反应的ROC曲线下面积0.95（P<0.01），基线Eadyn>0.85的预测灵敏度89.5%，特异度92.3%。结论Eadyn对具有容量反应性的休克患者快速扩容后血压反应性有良好的预测价值。

目的探讨先天性喉软化症手术的麻醉管理。方法回顾性分析浙江大学医学院附属儿童医院2010年12月至2012年11月拟诊断为先天性喉软化症患儿27例，经鼻插入相应大小的气管导管至声门上方给氧，连续静脉输注丙泊酚和瑞芬太尼维持麻醉，保留患儿自主呼吸。记录麻醉时间、手术时间、瑞芬太尼最大输注速度；术中监测心电图、心率、平均动脉压（MAP）、脉搏血氧饱和度（SpO2）、呼吸频率；观察术中并发症的发生情况。结果与麻醉诱导时比较，手术开始、手术开始后20 min、手术结束时的心率、RR明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）；各时间点M AP、SpO2差异无统计学意义（P>0.05）。诱导达到外科手术条件时间9~12 min，瑞芬太尼最大输注速度为（0.18±0.03）μg·kg-1·min-1。3例（11%）患儿出现肢体运动，单次缓慢给予丙泊酚1 mg/kg后消失；2例（7%）患儿术中短暂出现SpO2<95%，予降低瑞芬太尼输注速度后缓解。术中无咳嗽、低氧血症、喉痉挛、恶心、呕吐、心率失常并发症发生。结论先天性喉软化症患儿麻醉管理的关键是术前仔细评估患儿合并的其他疾病，使用保留自主呼吸的全凭静脉麻醉技术，加强术中监测，合理调整麻醉深度。

目的探讨Rho A/Rho激酶（ROCK）信号通路对类风湿关节炎（RA）患者成纤维样滑膜细胞（FLS）迁移、侵袭和增殖的调控作用。方法RA患者FLS来源于11例活动性RA患者滑膜组织。另设骨关节炎（OA）组和外伤（正常对照组）为对照。用不同浓度的RhoA抑制剂C3转化酶或ROCK抑制剂Y27632处理RA患者FLS，在迁移和侵袭实验中用10%胎牛血清（FBS）作为诱导物，在增殖实验中以IL-1β为刺激剂。Rho A活性检测采用pull down方法；ROCK活性用磷酸化肌球蛋白结合亚单位1（MYPT1）蛋白表达来表示，磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法；FLS迁移和侵袭能力采用Transwell小室测定；细胞增殖检测采用MTT法。结果新鲜分离的RA患者FLS中RhoA和ROCK活性显著高于OA患者和正常对照组，单独FBS诱导组、C3转化酶处理组和Y27632处理组迁移细胞数分别为85±14、51±15、42±11，侵袭Matrigel基质细胞数分别为64±13、39±12、26±9，单独FBS诱导组与其他两组比较差异均有统计学意义（均P<0.05），C3转化酶和Y27632对RA FLS的细胞骨架的聚合亦有显著的抑制作用。C3转化酶和Y27632呈剂量依赖性地抑制RA FLS增殖。结论RhoA/ROCK信号通路对RA FLS的迁移、侵袭和增殖具有调控作用，通过抑制过度活化的ROCK可能有利于抑制RA关节破坏。

目的探讨抑制葡萄糖调节蛋白78 (GRP78) 表达对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用和机制。方法构建特异性靶向GRP78的siRNA表达质粒，MTT法检测细胞生存率，逆转录多聚酶链链式反应和免疫印迹方法检测内质网应激相关、凋亡相关基因蛋白表达，流式细胞术检测细胞凋亡率。结果顺铂（6 mg/L）作用于SKOV3细胞诱导GRP78、CHOP和cleaved-caspase 4表达均增高；作用于SKOV3/DDP细胞可诱导GRP78表达明显增高，但CHOP和cleaved-caspase 4表达无明显差异。抑制GRP78表达与顺铂联合作用能明显增加SKOV3/DDP细胞cleaved-caspase 4和3表达，增加细胞凋亡率。抑制SKOV3/DDP细胞GRP78表达，能降低顺铂诱导的p-Akt和p-mTOR表达上调，增加XBP1 mRNA剪切表达和CHOP mRNA表达。结论抑制GRP78表达能与顺铂协同作用增加细胞凋亡的发生而逆转SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性，其机制可能是通过影响Akt/mTOR信号通路的活性、CHOP表达水平和caspases活性导致的。

目的探讨以nHA/RHLc/PL A复合支架材料为载体混合附载BMSCs来源的内皮细胞与成骨细胞修复犬股骨头坏死的可行性。方法BMSCs向内皮细胞（ECs）、成骨细胞（OBs）诱导分化14 d后，消化、收集细胞，调整细胞密度分别为1.0×106/ml，与nHA/RHLC/PLA支架材料共培养2~4 h，制成支架-细胞复合体。选取6~8月龄杂种犬18只36后肢股骨头造模，根据骨缺损处植入物不同分为3组各12肢：A组（支架-ECs+OBs）、B组（支架-OBs）、C组（单纯支架）。术后12、24周取材，行大体及组织学、免疫组化、形态学计量评价骨修复效果。结果组织学检测：A组3个月时见缺损区基底部有大量的类骨质和新生骨小梁形成，在骨小梁的边缘存在较多的成骨细胞，修复区血管丰富。成骨反应由基底向中心部推进。6个月时充填区骨小梁成熟明显，可见有编织骨形成。缺损区中央偶见碎裂的支架材料；新骨形成量和成骨细胞数由基底部向外周递减，骨小梁的成熟度也由基底向外周递减。B组3个月时缺损区基底部也可见明显成骨反应、类骨质形成，但骨小梁数目及成骨细胞、毛细血管均较A组少，纤维组织多。C组仅在缺损基底边缘可见少量新生骨组织，骨小梁数量少，骨小梁带窄；较多肉芽组织形成，见较多炎性细胞。缺损区中央绝大部分为碎裂的不成形的支架材料残留。24周时通过图像分析系统测量新生骨基质面积百分比均值， A组为16.7%±2.2%；B组为13.6%±1.2%，C组为9.6%±2.0%，三组间成骨量有差异统计学意义（F=23.217， P<0.05）。结论骨髓基质干细胞来源的成骨细胞具有修复股骨头骨坏死的能力;内皮细胞和成骨细胞联合应用的成骨能力及血管化程度优于成骨细胞的单独修复，内皮细胞可以增强成骨细胞的成骨作用。

目的观察超氧化物歧化酶类似物Tempol对慢性脑缺血大鼠脑白质损害及认知功能的神经保护作用。方法健康雄性Wistar大鼠采用完全随机数字表法分为假手术组（n=12）、生理盐水组（n=15）、Tempol低剂量组（8 mg/kg）组（n=15）和Tempol高剂量组（30 mg/kg）组（n=15）。应用大鼠双侧颈总动脉结扎（2-VO）制备慢性脑缺血模型，然后用Morris水迷宫检测各组大鼠的空间学习记忆能力，慢性脑缺血6周后再通过MBP和APP免疫印迹检测脑白质损伤情况，通过测定HNE蛋白加合物了解脂质过氧化情况。结果Tempol降低了慢性脑缺血大鼠的Morris水迷宫实验的潜伏期（P<0.05）。Tempol低剂量组（0.82±0.17）和Tempol高剂量组（0.91±0.15）大鼠脑白质MBP平均相对光密度较生理盐水组（0.44±0.13）增高（均P<0.01）。Tempol低剂量组（0.55±0.13）和Tempol高剂量组（0.46±0.15）大鼠脑白质APP平均相对光密度较生理盐水组（0.96±0.19）降低（均P<0.01）。Tempol低剂量组（0.20±0.035）和Tempol高剂量组（0.18±0.031）大鼠脑白质HNE蛋白加合物平均相对光密度较生理盐水组（0.29±0.039）降低（均P<0.01）。结论抗氧化剂Tempol可能通过保护慢性缺血性脑白质损伤而改善大鼠的学习记忆能力，并且Tempol减少脂质过氧化物的形成可能是其保护慢性缺血性脑白质损伤的机制之一。