2007年 · 第45卷第05期

目的 比较上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心1999年开始使用的儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)治疗方案(以下简称99方案)，和在99方案基础上减轻治疗强度并从2005年开始使用的修正方案(以下简称05方案)诱导治疗的疗效、安全性，以提高儿童ALL的疗效。 方法 纵向对比1999年1月1日至2006年3月1日初治的311例ALL患儿临床资料；以2005年5月1日为分界线分为99方案组和05方案组。99方案组243例，05方案组68例。对两组患儿起病时临床资料、治疗反应、缓解情况、治疗相关的感染情况等进行统计分析。 结果 两组病例起病时各项临床资料(性别、年龄、诊断时外周血白细胞计数)差异均无统计学意义(P均>0.05)，两组的缓解率(91.8% vs. 95.6%, P＝0.29)和缓解时微小残留病(MRD)监测结果(P＝0.17)差异也无统计学意义，99方案组与05方案组达到缓解所需时间(34.18±4.96 d vs. 32.34±3.36 d)、治疗相关的感染率(54.7% vs. 23.5%)、重症感染的发生率(9.1% vs. 0)和病死率(3.7% vs. 0)差异均有统计学意义。 结论 05方案和99方案在儿童ALL的诱导缓解治疗上都能取得良好的疗效，而05方案在疗效确切的同时具有更高的安全性。

目的 探讨血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平与儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)发病的关系；研究HMGB1对白血病细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的关系。 方法 采用Western blot方法检测正常、ALL患儿初治期、完全缓解期各15例血清HMGB1水平；制备HMGB1重组蛋白刺激人K562白血病细胞损伤模型，采用ELISA和Western blot方法检测HMGB1对TNF-α分泌及其p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)MAPK信号通路活化的影响；采用ELISA方法检测MAPK抑制剂对HMGB1所致TNF-α分泌的影响。 结果 初治ALL患者血清HMGB1 [(43.78±4.62)μg/L]显著高于正常对照组[(0.60±0.48)μg/L，P<0.01]和缓解组[(0.89±0.62)μg/L，P<0.01]，正常对照组与缓解组比较差异无统计学意义(P>0.05)；HMGB1以时效和量效依赖性方式诱导K562细胞分泌TNF-α并且促进了p38、JNK、ERK蛋白发生磷酸化；p38抑制剂(SB203580)、JNK抑制剂(SP600125)和MEK抑制剂(PD98059)抑制了HMGB1诱导K562细胞TNF-α的分泌。 结论 血清HMGB1水平与儿童ALL发病、发展密切相关；HMGB1通过活化MAPK信号通路促进白血病细胞分泌TNF-α参与肿瘤细胞免疫调节。

目的 通过荧光染料Calcein-AM(C-AM)在K562及其耐长春新碱(VCR)的细胞系K562/VCR细胞中的变化以及异搏定(VER)、环孢霉素A(CSA)对C-AM在K562和K562/VCR细胞中摄取与排出的影响，研究C-AM在评价P-gp泵功能的作用，评价两种逆转剂的逆转作用，为临床合理应用逆转剂提供实验依据。 方法 以K562及K562/VCR为实验对象，以流式细胞术测定两种细胞系内不同时间点(0、30、60、90和120 min)的C-AM荧光强度来反映P-gp泵功能以及CSA、VER对其的影响。 结果 C-AM在K562和K562/VCR细胞中的变化以24 h内最为明显，24 h后K562细胞和K562/VCR细胞内C-AM荧光强度分别下降至14.57%和15.64%。其在K562细胞内各时间点的平均荧光强度(MFI)明显高于K562/VCR细胞(各时间点差异P值均<0.05)；CSA、VER和CSA＋VER对K562细胞内C-AM的摄取和外排无明显影响，但各组逆转剂、C-AM与细胞共孵育120 min后，对照组、CSA、VER和CSA＋VER组的K562/VCR细胞MFI分别为3251±106.7、4014±219.0、3879±116.1和4158±302.6，与对照组相比，后三组细胞对CAM的摄取明显增加(P均<0.05)。当外排120 min后，对照组、CSA、VER和CSA＋VER组的K562/VCR细胞MFI分别为1622±191.0、2237±155.2、1932±233.0和2231±146.7，与对照组相比，后三组的CAM残余量也明显增加(P均<0.05)，表明CSA、VER和CSA＋VER能增加K562/VCR细胞对C-AM的摄取和减少细胞内C-AM的外排。 结论 P-gp的表达能减少K562/VCR细胞对C-AM的摄取和增加其对C-AM外排，逆转剂CSA与VER的联合应用对K562/VCR细胞摄取和外排C-AM的影响并不比单独使用CSA或VER明显，通过使用C-AM和流式细胞术，可以比较迅速、简便评价白血病细胞P-gp的泵功能以及逆转剂的逆转作用。

目的 观察乙型肝炎病毒相关性膜性肾病(HBV-MN)患儿肾小球足细胞数量的变化及意义。 方法 以Wilms瘤蛋白1(WT1)为足细胞核的特征性标记，通过免疫组织化学方法对19例经肾穿刺活检确诊为HBV-MN患儿及8例同期肾活检诊断为薄基底膜病(TBMD)的患儿(对照组)肾脏病理切片的足细胞进行特异性染色，采用Weibel-Gomez点计数方法测定单位肾小球足细胞绝对数目(Npodo)、足细胞相对密度(Nv)及单个肾小球毛细血管簇体积(V)，比较两组间差异，并分析其与血清免疫学检查、蛋白尿程度及肾组织病理改变等指标间的关系。 结果 ①19例HBV-MN患儿的超微病理结果均显示存在不同程度的足突融合，3例有足突微绒毛化，4例出现足细胞肿胀，1例足细胞空泡变性，2例可见足细胞崩解；②HBV-MN患儿Npodo及Nv均较对照组显著下降﹙P<0.01)；③Npodo的减少与肾小球中HBsAg的沉积强度相关，HBsAg免疫荧光强度≥(＋＋)患儿的平均Npodo明显低于荧光强度<(＋＋)者(P<0.01)；但Npodo及Nv的下降均与肾脏病变病理分期无显著相关性；④Nv减少与蛋白尿程度相关，24 h尿蛋白定量<2 g患儿的Nv明显高于>2 g者﹙P<0.05﹚；⑤肾小球足细胞数量与血清补体C3水平呈正相关(r＝ 0.548, P＝ 0.028)，而与血清白蛋白水平无显著相关性(r＝-0.037, P＝ 0.891)。 结论 HBV-MN患儿均存在不同程度的足细胞损伤、缺失，Npodo减少可能在HBV-MN的发病中起重要作用。

目的 评价近红外光谱仪(NIRS)脑氧合指标与新生猪脑血流的相关性，以寻找能最好反映脑血流变化及脑血管自主调节功能的NIRS指标。 方法 10头出生前1~3 d新生猪随机分为两组：正常对照组(6头)、低血压组(4头)。人为动脉放血造成血压及脑血流的改变。应用NIRS连续监测脑组织氧合血红蛋白(ΔHbO2)与还原血红蛋白(ΔHHb)的动态变化，计算二者之和ΔtHb (ΔtHb＝ΔHbO2＋ΔHHb)及二者之差ΔHbD (ΔHbD＝ΔHbO2-ΔHHb)。同时应用彩色微球技术定量测定脑血流的变化，并对测定结果进行线性回归分析。 结果 对NIRS测定的ΔtHb、ΔHbD和彩色微球定量测得的全脑(GCBF)以及大脑皮层脑血流(CBFc)之间的关系进行线性回归分析。正常生理条件下，ΔHbD和ΔtHb与GCBF存在显著相关，相关系数分别为r1a＝0.409和r1b＝0.440，P均<0.05；ΔHbD和ΔtHb与CBFc也存在显著相关，相关系数分别为r2a＝0.394和r2b＝0.400，P均<0.05。低血压条件下，新生猪仅在MABP降至35 mm Hg(1 mm Hg＝0.133 kPa)时脑血流才显著降低(P<0.05)，而随着血压的逐渐降低， ΔHHb逐渐增高(P<0.01)，ΔHbO2和ΔtHb先有升高趋势(P<0.05)，然后在MABP降至35 mm Hg时才显著降低(P<0.01)，ΔHbD与GCBF、CBFc采用线性回归分析所得的相关系数r3a＝0.890、r3b＝0.887差异有统计学意义，P均<0.01；而ΔtHb与GCBF、CBFc采用线性回归分析所得的相关系数r4a＝0.395、r4b＝0.375差异均无统计学意义，P均>0.05，ΔHbD与脑血流的变化趋势相同，二者密切相关；而ΔtHb与脑血流的变化未存在相关。新生猪MABP>35 mm Hg时脑血流与血压不相关，提示自主调节功能完整，将调节功能完整的新生猪脑血流、ΔHbD与相应的MABP值行线性回归分析显示相关系数<0.5; MABP<35 mm Hg时脑血流与血压相关，提示自主调节功能受损，将调节功能受损的新生猪脑血流、ΔHbD与相应的MABP值行线性回归分析显示相关系数>0.5。 结论 正常生理及低血压条件下，ΔHbD均能很好反映出脑血流的动态变化；ΔtHb仅在正常生理条件下能用来反映脑血流的动态变化。1~3 d新生猪脑血管自主调节的下限为35 mm Hg，NIRS氧合指标ΔHbD与MABP的相关性可以反映新生猪的脑血管自主调节状态。

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。 方法 7日龄新生Wistar大鼠96只，制备HIBD模型，随机分为生理盐水对照组和bFGF治疗组；另取48只为假手术组。通过免疫组化方法检测三组大鼠(每组40只)不同时点(术后第4、7、10、17、24天)海马CA1区巢蛋白(Nestin)、生长相关蛋白(GAP-43)的表达。各组余8只大鼠于生后30d开始进行Morris水迷宫测试，观察其学习记忆功能。 结果 (1) Nestin表达：对照组术后第4、7、10、17、24天Nestin阳性细胞数(9.51±1.45、11.35±1.87、17.12±2.13、11.17±1.11、2.92±1.02)较假手术组(6.17±1.85、4.92±1.88、3.75±1.22、3.08±1.20、2.83±1.12)增加，治疗组各时点Nestin阳性细胞数(14.83±1.75、19.17±1.69、24.50±1.45、28.33±1.67、16.17±1.69)增加较对照组更明显，三组各时点比较差异有统计学意义(P<0.01)。(2)GAP-43表达：三组新生鼠GAP-43表达均于术后第10天达高峰，积分光密度值对照组术后第4、7、10、17、24天(9.35±1.10、12.94±1.01、14.29±1.21、13.28±1.26、6.51±0.99)较假手术组(7.88±1.27、11.75±1.30、13.06±1.54、11.79±1.18、4.66±0.91)均升高，治疗组(10.63±1.02、13.98±0.79、15.11±0.89、14.60±1.28、7.40±1.08)升高更明显，三组各时点比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)对照组逃避潜伏期(51.75±11.27s)较治疗组(40.32±11.48s)和假手术组(36.58±10.83s)明显延长(P<0.05)；对照组拆除平台后跨越平台的次数(2.34±2.42次)较治疗组(5.08±3.86次)和假手术组(7.03±3.62次)明显减少(P<0.05)；治疗组与假手术组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 (1)新生鼠HIBD后海马CA1区Nestin、GAP-43的表达增加，可能与脑损伤后神经再生和轴突重塑有关；(2)bFGF可明显改善大鼠HIBD后的学习记忆能力；(3)外源性bFGF可增强新生鼠脑缺氧缺血后损伤区Nestin、GAP-43的表达，在神经细胞损伤的修复中发挥一定的保护作用。

目的 探讨弥散加权成像(DWI)对新生儿脑梗死(NCI)早期的诊断价值。 方法 收集2004年6月至2005年10月，在我院新生儿科住院的6例NCI患儿的临床资料。全部病例完成了血常规、血糖、血清总钙及离子钙、C-反应蛋白、凝血酶原时间及部分凝血活酶时间、心脏彩色多普勒及头部MRI检查。并对其中4例进行MRI动态观察。 结果 (1)全部病例为足月儿，1例有重度窒息史，其余5例无明显宫内窘迫及出生窒息史。(2)5例以全身惊厥为首发症状。(3)全部病例无红细胞增多症，无出血及凝血机制障碍，心内结构正常。(4)MRI检查时间：发病后18 h至4 d。常规MRI 4例异常(T1WI低信号，T2WI高信号)，2例正常；DWI 6例异常(全部高信号),随访(2周至15个月)：常规MRI 6例异常(T1WI低信号，T2WI高信号)；DWI 6例异常(低信号)。梗死部位：4例左侧颞叶、顶叶和枕叶，1例左侧额叶和顶叶，1例左侧基底节。 结论 NCI早期，常规MRI尚未出现明显异常，DWI即显示明显高信号，从而证实DWI对NCI早期诊断的价值。

目的 观察新生儿脐血单个核细胞(MNC) TLR4、TLR2 mRNA的表达。 方法 将46例无窒息新生儿及40例窒息新生儿根据胎龄分组，分离脐血MNC，测定其TLR4/2 mRNA表达及上清中TNF-α水平。另外将TLR4/2 mRNA表达水平与TNF-α水平进行相关分析。 结果 无窒息新生儿中足月儿TLR4/2 mRNA及TNF-α水平分别为0.75±0.12、0.63±0.08、2502.6±273.1 ng/L，胎龄≥32周但<37周早产儿分别为0.37±0.04、0.32±0.03、1218.8±145.7 ng/L，胎龄<32周早产儿分别为0.26±0.03、0.20±0.03、811.8±105.2 ng/L;窒息新生儿中足月儿TLR4/2 mRNA及TNF-α水平分别为0.58±0.07、0.50±0.06、1946.4±244.2 ng/L，胎龄≥32周但<37周早产儿分别为0.29±0.03、0.26±0.03、970.0±94.3 ng/L，胎龄<32周早产儿分别为0.17±0.02、0.14±0.02、652.6±60.3 ng/L；成人TLR4/2 mRNA及TNF-α水平分别为2.71±0.75、2.61±0.33、9270.1±1098.3 ng/L。早产儿、足月儿TLR4/2 mRNA及TNF-α水平均低于成人，胎龄越低，TLR4/2 mRNA及TNF-α水平越低。窒息新生儿TLR4/2 mRNA及TNF-α的表达水平均低于同胎龄无窒息新生儿(P<0.01)。 TLR4/2 mRNA表达水平与TNF-α水平呈正相关关系。 结论 新生儿，特别是早产儿，TLR水平低下，可能是新生儿天然免疫能力低下，容易患败血症等严重感染性疾病的重要原因之一。

目的 探讨重组人胰岛素样生长因子1(rh-IGF-1)对高氧暴露下的新生大鼠肺损伤的影响。 方法 将生后2d的Wistar大鼠80只，随机分为4组。Ⅰ组：空气组；Ⅱ组：高氧组；Ⅲ组：空气＋ rh-IGF-1组；Ⅳ组：高氧＋ rh-IGF-1组。Ⅱ组和Ⅳ组大鼠持续暴露于85% O2中，Ⅰ组和Ⅲ组大鼠呼吸空气。Ⅲ组和Ⅳ组从第3天起每日腹腔注射rh-IGF-1, 1 μg/Kg。于高氧暴露后7 d取肺组织，用免疫组化方法检测肺内CC10表达变化，用TUNEL方法检测肺细胞凋亡。 结果 免疫组化结果阳性染色主要分布于终末及呼吸性细支气管上皮细胞。Ⅱ组终末和呼吸性细支气管上皮Clara细胞占上皮细胞的百分率(32.17±3.19)%和免疫阳性强度(29.45±5.56)，均明显少于Ⅰ组的测定值(68.32±2.04)%和(42.37±3.24)，差异均有统计学意义(P< 0.01)；Ⅱ组肺组织细胞凋亡指数(55.77±6.09)%明显高于Ⅰ组的测定值(16.41±4.01)%，差异有统计学意义(P<0.01)；Ⅳ组的Clara细胞百分率(52.98±2.68)%和免疫阳性强度(41.22±6.36)较Ⅱ组明显增加，Ⅳ组的细胞凋亡指数(27.98±3.09)%明显低于Ⅱ组的测定值，差异均有统计学意义(P< 0.01)。而Ⅰ组与Ⅲ组之间差异无统计学意义(P> 0.01)。 结论 高氧诱导肺细胞凋亡、抑制肺内CC10分泌，而rh-IGF-1通过抑制肺细胞凋亡，能够有效抑制CC10分泌的减少，减轻气道炎症反应，抑制肺泡化阻滞，对高氧性肺损伤起保护作用。

目的 探讨共患和不共患破坏性行为障碍(DBD)的儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)与5-HT2C受体基因(HTR2C)C-759T和G-697C两种多态之间的关联。 方法 就237个共患DBD的ADHD核心家系和251个不共患DBD的ADHD核心家系的C-759T和G-697C两种多态进行检测，并对各等位基因和单体型进行传递不平衡检验(TDT)。 结果 在共患DBD的家系中未发现任何等位基因和单体型的传递不平衡现象。在不共患DBD的家系中，-759C(χ2＝4.25，P＝0.04)优先传递，-697G(χ2＝3.21，P＝0.07)有优先传递的趋势，就单体型而言，-759C/-697G优先传递(χ2＝4.31，P＝0.04)。 结论 ADHD共患DBD与否在HTR2C基因C-759T和G-697C两种多态水平上有明显的遗传差别。HTR2C基因与不共患DBD的ADHD相关联。

目的 了解北京地区儿童青少年血压的现况。 方法 按分层整群随机抽样法在北京市4个城区和3个郊区县的3~18岁儿童和青少年中，用"美国高血压教育项目工作组"和"中国高血压防治指南"推荐的测量方法进行收缩压(SBP)和舒张压(DBP)测量。记录、整理、分析血压测量的结果。 结果 北京地区3~18岁儿童青少年血压调查的有效数据人数20 780人，城区10 582人(50.9%)，郊县10 198人(49.1%)；男10 398人(50.0%)，女10 382人(50.0%)。男童血压高于女童[SBP ：(106±12) mm Hg vs(101±11) mm Hg，u＝27.14，P<0.01；DBP ：(67±9) mm Hg vs(65±8) mm Hg，u＝14.14，P<0.01](1 mm Hg＝0.133 kPa)。男女童血压均随年龄增长有逐渐增高的趋势，且SBP上升幅度较DBP高。城区儿童SBP和DBP的平均水平低于郊县儿童[SBP ：(103±12) mm Hg vs(104±12) mm Hg，u＝2.55，P<0.05；DBP ：(66±8) mm Hg vs(67±9) mm Hg，u＝6.73，P<0.01]。血压与年龄、身高、体重及体块指数(BMI)均有显著的正相关(P<0.001)，收缩压与各变量的相关程度均较舒张压高。依据1987年北京市6~18岁儿童青少年性别年龄别血压标准，本次调查6~18岁儿童青少年高血压检出率为8.1%。 结论 获得了北京地区儿童青少年血压的分布特征；血压值与儿童的性别、年龄、身高、体重和BMI相关。

目的 了解武汉地区儿童肺炎链球菌携带率、耐药性、耐药基因及血清型流行状况。 方法 采集鼻咽拭子，以琼脂稀释法测定肺炎链球菌对12种抗菌药物的最低抑菌浓度，聚合酶链式反应检测红霉素耐药基因，荚膜肿胀试验进行血清学分型。 结果 武汉地区儿童肺炎链球菌携带率为22.31%(135/605)。存活的133株细菌中，青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)发生率为45.9%(61/133)；头孢菌素第一代(头孢氨苄)、二代(头孢克洛)、三代(头孢克肟、头孢泊肟、头孢曲松)敏感率依次为6.0%、45.1%、54.9%、56.4%、88.7%；除1株环丙沙星低耐株外，未发现氟喹诺酮类耐药株。大环内酯类敏感率仅为14.3%~15.8%。在114株红霉素耐药株中，检出ermB基因76株(66.7%)，2株(1.8%)低耐株含有mefA基因，46株(40.4%)同时具有ermB和mefA基因。血清分型涉及17个血清群，主要分布在19、23、6、15和14血清群，7株细菌未能分群。PNSSP分布在19、23、6和未分型血清群。 结论 武汉地区肺炎链球菌耐药严重，红霉素耐药主要为核糖体修饰(ermB介导)引起。流行血清群以19、23、6为主。

目的 探讨RhA/Rho激酶在高肺血流所致肺血管结构重构过程中所起的作用。 方法 108只4周龄Wistar大鼠随机分到4个分流组、4个对照组，分流组大鼠接受左侧颈总动脉-颈外静脉分流术，对照组大鼠作假手术。在术后1、2、4、8周，分别测量右心室收缩压，作血气分析计算Qp/Qs。肺组织切片HE染色光镜下观察肺血管形态学改变，测量并计算中等血管中膜厚度所占管径百分比(MT%)。免疫组化增殖细胞核抗原(PCNA)染色分析平滑肌细胞增生情况。用TUNEL细胞凋亡标记分析平滑肌细胞凋亡状况。pull down assay分析RhoA活性，Western blot检测RhoA、Rho激酶(ROCK2)的蛋白表达以及MYPT1磷酸化程度量化分析Rho激酶活性。 结果 颈总动脉-颈外静脉分流导致肺循环血流量增加， Qp/Qs平均值为2.26±0.35。分流组RVSP在术后1周和8周较对照组高(t＝8.799，t＝5.332，P<0.01)。与对照组相比，分流组以平滑肌细胞过度增生和肥大为特征的中等肺动脉中膜增厚，MT%升高在第4周开始出现，到第8周更为明显(t＝9.192，t＝11.185，P<0.01)。分流组PCNA阳性平滑肌细胞在第1周显著升高，第2周达最高值，与对照组相比，差异有统计学意义(t＝7.213，P<0.01)，到第4周下降到显著低于对照组(t＝4.183，P<0.01)，并持续降低，到第8周几乎观察不到增生的平滑肌细胞(t＝6.152，P<0.01)。TUNEL阳性平滑肌细胞在第2周较对照组低(t＝2.418，P<0.05)，并持续降低，到第8周几乎观察不到凋亡的平滑肌细胞(t＝4.582，P<0.01)。RhoA和ROCK2表达在第1周即高于对照组(t＝6.056，t＝8.411，P<0.01)，第2周达高峰(t＝9.342，t＝10.437，P<0.01)。到第4开始下降，但是到第8周仍然显著高于对照组(t＝4.743，t＝4.455，P<0.01)。RhoA和Rho激酶活性在第1周也显著高于对照组(t＝10.246，t＝19.110，P<0.01)，到第4周达高峰(t＝24.984，t＝16.124，P<0.01)，然后开始降低，但是二者到第8周仍然显著高于对照组水平(t＝4.934，t＝10.426，P<0.01)。 结论 在高肺血流所致的大鼠肺血管收缩和结构重构与RhoA/Rho激酶的表达和活性增强有关。